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人低分子肝素（LMWH）ELISA试剂盒技术指导

发布时间：2018/1/8 15:26:13

型号：

价格：电议

采购度：151

原产地：美洲

简单介绍：人低分子肝素（LMWH）ELISA试剂盒技术指导用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中人低分子肝素（LMWH）的含量。

标签：人低分子肝素 LMWH厂家 ELISA试剂盒技术指导

详细信息

人低分子肝素（LMWH）elisa试剂盒技术指导
本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中人低分子肝素（LMWH）的含量。
有效期：6个月
保存条件：2-8℃
本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断

实验原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被人低分子肝素（LMWH）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的人低分子肝素（LMWH）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

实验前的准备

1.仔细阅读说明书
2确定试剂盒在有效期内
3按说明书确定所有试剂齐全(数量、体积)
4标本制备要规范，每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备(贮存)，尽量分装做备份。短期内无法实验者，注意低温保存
5准备好所有实验额外所需物品，如试管、吸头、移液器、离心机等
6.根据检测标本数量确定所需试剂的量
7.按说明书将所用试剂平衡至室温，配制所需试剂

主要优点
1.高效、灵敏、特异的抗体；
2. 稳定的重复性和可靠性；
3. 吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相载体；
4. 适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型；
5. 限度的节省实验经费。

常用的使用方法
一、双抗体夹心法测定抗原
将抗原免疫种动物获得的抗体吸附于固相表面;
加抗原，形成抗原-抗体复合物;
加抗原免疫第二种动物获得的抗体，形成抗体抗原抗体复合物;
加酶标抗抗体(第二种动物抗体的抗体);
加底物。底物的降解量＝抗原量。
二、直接法测定抗原
将抗原吸附在载体表面；
加酶标抗体，形成抗原—抗体复合物；
加底物。底物的降解量＝抗原量。
三、间接法测定抗体
将抗原吸附于固相载体表面；
加抗体, 形成抗原-抗体复合物；
加酶标抗体；
加底物。测定底物的降解量＝抗体量。

结果计算：
在半对数坐标纸上绘制标准曲线。标准品的浓度为X轴，相应的OD值为Y轴，用四参数或对数-对数法绘制*合适的标准曲线。浓度与OD值成反比关系，随着标准品浓度的增加，黄色强度就减少，即OD值减少样本浓度可直接从标准曲线上读取。如果样本实验前进行了稀释，则试剂盒*后结果应乘以相应的稀释因子标准曲线为逆向S型曲线。
附：采用全自动酶标仪检测，只需检测前设置好酶标仪的相关参数，如坐标参数（线性，半对数）和计算方式参数（三次回归、四参数或双对数曲线方程），即可直接得到结果。
产品名称存放：收到货后贮存于4℃，强烈建议尽快使用配制的试剂1X缓冲液贮存于4℃，将不用的微孔板放回至密封袋内密封起来，贮存于4℃，已稀释的标准品，生物标记物，抗体和HRP贮存于4℃。

注意事项
1. 由于产品底物显色剂对光及其敏感，因此要避光保存。
2. 检测吸光度前应将酶标仪打开，将其预热30min以上。
3. 孵育的时间应该严格按照试剂盒说明书上的时间为准。
4. 要尽量做双孔实验，这样才既能保证数据的准确性，又能反映出试剂盒的精密度。
5. 对样本的结果有疑问时需要使用其他检测方法进行验证。

常见问题
灵敏度是什么意思？
根据我司多年来的销售经验，我司了解到客户针对购买elisa试剂盒时，灵敏度要求非常高。这是为什么呢？为您解析Elisa试剂盒灵敏度。Elisa试剂盒灵敏度高能使产品达到一定的数值，对产品试验有着非常大利益，它能检测到的分析物的*小量，表示检测下限的能力。
相对灵敏度=真阳性/（真阳性+假阴性）×100%
测定方法及表示方法：灵敏度标准品、质控血清、阳性标本稀释终点、血清盘（pannel）及临床标本阳性率。
灵敏度标准品可以从卫生部临检中心购买，质控血清可以从卫生部临检中心购买，也可以自己配制。因为质控血清不一定是原倍血清，或由于片段、亚型、位点等原因，评定试剂盒的灵敏度都带有一定的片面性。
阳性标本稀释终点的方法常用于不同试剂盒的比较，但也有上述的片面性。阳性pannel有些可以从卫生部临检中心购买，如HBsAg阳性pannel，也可以自己配制。临床标本阳性率，是一种粗略的估计，但对临床很实用。

更新时间：2024/2/19 16:59:25

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