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过氧化物酶偶联法测定血清尿酸

发布日期：2014/4/8 10:31:19 阅读次数：1839次

【实验原理】尿酸在尿酸酶催化下，氧化生成尿囊素、CO2和H2O2，H2O2与3，5-二氯-2-羟苯磺酸（DHBS）和4-氨基安替比林（4-AAP）在过氧化物酶催化下，生成醌亚胺化合物，波长520nm下比色，吸光度值与样品中尿酸浓度成正比。

【试剂与器材】

1．酶混合试剂尿酸酶 160U／L 过氧化物酶 1 500U／L 4-AAP 0．4mm01／L DHBS 2mm01／L 磷酸盐缓冲液（pH 7.7） 100mmo1／L 2．6．0mmol／L尿酸标准贮存液称取碳酸锂60mg，溶解于60℃蒸馏水40ml中，加入尿酸（C5H4O3N4，MW 168．11）100．9mg，待完全溶解后冷却至室温，移入100ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至满刻度，置棕色瓶中保存。 3.300μmol／L尿酸标准应用液取尿酸标准贮存液5．0ml于100ml容量瓶中，加乙二醇33ml，加蒸馏水稀释至刻度。【操作步骤】 1．自动生化分析法按仪器说明书的要求进行测定。

2．手工操作法混匀，室温放置10分钟，在520nm波长下，以空白管调零，读取吸光度。【结果计算】【参考区间】健康成年男性：208～428μmol／L；健康成年女性：155～357μmol／L。【临床意义】多种原因可引起高尿酸血症并导致痛风症。

1．原发性高尿酸血症原发性肾脏排泄尿酸减少，占原发性中800%～90％，为多基因性常染色体显性遗传所致。尿酸产生过多，以从头合成嘌呤过多为主，占原发性的10％～20％，也是多基因性常染色体显性遗传；而特异性酶缺陷，如次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶（HGPRT）部分缺乏或完全缺乏等，导致鸟嘌呤和次黄嘌呤不能经补救途径合成嘌呤核苷酸，而使尿酸产生过多者，仅占原发性的1％。

2．继发性高尿酸血症继发性高尿酸血症可由于尿酸产生过多或尿酸排泄减少引起。尿酸产生过多见于骨髓增殖性疾病如各类白血病、多发性骨髓瘤、红细胞增多症，慢性溶血性贫血、全身扩散的癌症、恶性肿瘤化疗或放疗后和严重的剥脱性牛皮癣等。尿酸排泄减少常由引起肾小球滤过减少和（或）肾小管排泌尿酸减少的肾脏疾病所致，如急慢性肾炎，其他肾脏疾病的晚期如肾结核、肾盂肾炎、肾盂积水等。氯仿中毒、四氯化碳中毒及铅中毒、子痫、妊娠反应及食用富含核酸的食物等，均可引起血中尿酸含量增高。

3．低尿酸血症恶性贫血、Fanconi综合征时血液尿酸浓度降低。

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