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elisa试剂盒实验常见问题

发布日期:2012/11/16 10:13:46 阅读次数:1039次

ELISA试剂盒简介
ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。 ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。   
然而,影响Elisa试验结果的因素很多,故加强各个环节的质量保证才能充分发挥其方法学的优点。

elisa试剂盒实验常见问题分析 

1.ELISA试剂盒回收率是什么意思

回收率是反应待测物在样品分析过程中的损失的程度,损失越少,回收率越高,如果作标液1PPM,就是1毫克/升,而作出标准数据为0.99毫克/升,就是说你的回收率是99%,这个与真实成分有密切的关系,说明方法的准确度。比如水中总无机氯含量测定, 样品水中含有无机氯 20 mg/L, 取 100mL 被测水样品, 加入 0.1mL 浓度为 10mg/mL 的含无机氯标准样品, 测定时忽略体积变化, 如果测定出样品中无机氯为 2.98mg/L, 则认为回收率为 98%,不知道这样解释楼主是否明白了。对于定量检测来说,主要还是一个准确度的验证。不过我看到别人写的内容比我自己想说的要好,所以就贴上去了。相对回收率可能会高于100%的,如果只是说“损失程度”,其实是不准确的。应该说,回收率越接近100%,说明这个试剂盒的准确度越高。

2.ELISA试剂盒冷冻后可以使用吗?

没有问题,但不要反复冻融,这个试剂盒是竞争ELISA,这和测激素的ELISA 盒子类似,测激素时我们是放在-20°C保存的,预包被板子也是-20°C保存,当时觉得奇怪,操作指南为什么这样要求,但测试结果正常。当然如果是正常的DAS-ELISA等,如病毒测试试剂盒,尤其是正多面体病毒(即通常说的球形病毒),应该放在4°左右冰箱保存。建议盒子解冻后一次用完
 

 

 

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