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劲马生物|多了解一些，才能更好地使用Elisa试剂盒

发布日期：2022/5/31 16:29:49 阅读次数：524次

以人白介素18(IL-18)为例，Elisa试剂盒用于人血清、血浆及相关液体样本中白介素18(IL-18)的测定。采用的是双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定样品中人白介素18(IL-18)的水平。向预先包被了人白介素18(IL-18)单克隆抗体的酶标孔中加入白介素18(IL-18)，温育；温育后，加入标记的抗白介素18(IL-18) 抗体，再与链霉亲和素-HRP结合，形成免疫复合物，再经过温育和洗涤，去除未结合的酶，然后加入底物A、B，产生蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅与样品中人白介素18(IL-18)的浓度呈正相关。

Elisa试剂盒的使用须知：

1.分析质控

① 特色：在固相外表组装免疫活性物质形成“免疫吸附剂”；

② 酶标记免疫活性物质，进行信号扩大；

③ 有二步温育反应二次洗涤过程；

④ 灵敏度特异性相对较高；

⑤ 局限性：只能检测到ng；

⑥ 精密度差(批内CV15-20%)；

⑦ 线性规模窄(一个数量)；

⑧ 存在"HD-HOOK"效应。

2.试验检测人员需经过培训，把握这几方面的技术知识：

① 检验项目的基本原理；

② 实验意义；

③ 熟悉检测技巧，了解易出差错的环节及难点；

④ 熟悉检测试剂功能(包括试剂盒组成，包被片段及其组成)；

⑤ 熟悉检测仪器的原理及功能；

⑥ 把握数据处理的能力和质量操控知识；

⑦ 某些特别项目的检测如抗HIV等需经有关部门组织的门培训班，考试合格后持证上岗。

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