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关于血清灭活的几个问题

发布日期:2021/3/19 9:51:50 阅读次数:1183次

1、问:加到培养基中的血清必须灭活吗?

答:不是必须的,看做什么实验了。

2、问:四季青胎牛血清灭活是56℃30分钟吗?

答:如果用于培养大多数的肿瘤细胞,血清般是不需要灭活的,这样可以有效保存血清中的生长因子。但是如果用于培养些表面具有补体受体的细胞,如内皮细胞,血清是需要灭活,般是56℃,30min。

3、问:我要做滋养细胞培养,胎牛血清要灭活吗?

答:进口的般都已灭活,国产的不定,还是灭活下再用较安全。

4、问:我用病毒上清转染细胞,培养用的血清需要灭活吗?因为血清中可能有些补体和抗体,是不是会影响转染?我想未灭活的血清中含些抗体补体可能会和病毒相结合,影响转染,正确吗?细胞是单核细胞白血病细胞,病毒是病毒包装细胞PT67收集的病毒上清。为什么要用无血清培养基加病毒孵育几小时,目的是什么?

答:血清定要灭活,可以先用无血清培养基加病毒孵育几小时以后再加血清。避免杂蛋白对病毒和宿主结合过程的干扰,般是2-6小时,根据细胞的状态决定。血清不定需要灭活,灭活的目的是将血清中的补体灭活!这要根据实际情况而定,如果没有把握那就灭活吧,也不麻烦56度半个小时。

5、问:(1)我买的是杭州四季青的新生牛血清,要灭活吗?有些说法是需要,有些说直接解冻后就可以加入到培养基中;我配制胰蛋白酶液,用的是D-PBS,有关系吗?

答:关于血清的热灭活,是很多人感兴趣也存在定争议的话题。大多数实验室将血清的热灭活还是作为常规来执行,因为有两个作用,第yi是灭活补体,第二是灭活血清中可能存在的支原体。但是实验者并没有考虑热处理对血清中的生长因子、氨基酸等成分带来的负面影响。

原创作者:上海劲马实验设备有限公司

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