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看了这些,轻松掌握elisa试剂盒的使用

发布日期：2017/6/26 11:39:14 阅读次数：3609次

        您还在为了elisa试剂盒的使用问题一筹莫展嘛,上海劲马愿意帮助您轻松解决烦恼，带您了解elisa试剂盒使用技巧与方法。
       ELISA试剂盒使用方法一：双抗体夹心法
1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃ 过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。（简称洗涤，下同）。
2. 加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。（同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔）。
3. 加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体（经滴定后的稀释度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。
4. 加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。
5. 终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+"、“-"号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm（若以ABTS显色，则410nm）处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。

      ELISA试剂盒使用方法二：间接法
1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃过夜；
2.次日洗涤3次；
3.加一定稀释的待检样品（未知抗体）0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤；
4.（同时做空白、阴性及阳性孔对照）于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二抗体（抗抗体）0.1ml；
5.37℃孵育35-60分钟，洗涤；
6.’*后一遍用DDW洗涤。
其余步骤同“双抗体夹心法"的4、5、6。

     上海劲马多年专业酶免服务，为国内*专业的ELISA试剂盒供应商，不仅对质量进行严格保证，而且价格低廉，是国家重点实验室及国内各大院校长期指定供应商，我司是一家专业从事“产品研发生产、市场销售、技术服务”为一体的高科技生物技术公司，公司生产的产品质量有保证，含量高，能够给实验带来准确的结果。同时试剂随货附带质检报告和图谱，能为用户更好的解决各种疑难问题。如有需要可联系我司销售人员，我们将竭诚为您服务。

原创作者：上海劲马实验设备有限公司

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