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如何从肝脏等组织样本中提取DNA

发布日期：2015/12/30 10:51:01 阅读次数：6164次

在提取动物肝脏等组织样本DNA实验操作时一般根据以下原则：

1. 在浓氯化钠（1―2mol/L）溶液中，脱氧核糖核蛋白的溶解度很大，核糖核蛋白的溶解度很小。

2. 在稀氯化钠（0.14 mol/L）溶液中，脱氧核糖核蛋白的溶解度很小，核糖核蛋白的溶解度很大。

因此，可利用不同浓度的氯化钠溶液，将脱氧核糖核蛋白和核糖核蛋白从样品中分别抽提出来。将抽提得的核蛋白用SDS（十二烷基硫酸钠）处理，DNA或（RNA）即与蛋白质分开，可用―异戊醇将蛋白质沉淀除去，而DNA则溶解于溶液中。向溶液中加入适量乙醇，DNA即析出。为了防止DNA或（RNA）酶解，提取时加入EDTA（乙二胺四乙酸）。

提取DNA总的原则

1.保证核酸一级结构的完整性;

2.核酸样品中不应存在对酶有抑制作用的有机溶剂和过高浓度的金属离子;

3.其他生物大分子如蛋白质、多糖和脂类分子的污染应降低到程度;

4.其他核酸分子，如RNA，也应尽量去除。

生物组织DNA样品准备要求：

一.新鲜组纳，若不能马上提取，应贮存-70℃或液氮

二.液氮冷冻敲碎研磨

三.组织匀浆法

四.液氮匀浆法

原创作者：上海劲马实验设备有限公司

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