上海劲马实验设备有限公司

13817140470

当前位置:上海劲马实验设备有限公司 > 技术文章 > 猴促黄体生成素(LH)试剂盒

公司新闻

猴促黄体生成素(LH)试剂盒

发布日期:2011/12/26 11:50:48 阅读次数:5262次

                                             猴促黄体生成素(LH)试剂盒使用说明书

本试剂盒仅供研究使用。
检测范围:                                                          96T
100ng/L -3200 ng/L
 
使用目的:
本试剂盒用于测定猴血清、血浆及相关液体样本中促黄体生成素(LH)含量
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猴促黄体生成素(LH)水平。用纯化的猴促黄体生成素(LH)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入促黄体生成素(LH)再与HRP标记的促黄体生成素(LH)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的促黄体生成素(LH)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中猴促黄体生成素(LH)浓度。
试剂盒组成

1
30倍浓缩洗涤液
20ml×1瓶
7
终止液
6ml×1瓶
2
酶标试剂
6ml×1瓶
8
标准品(6400 ng/L)
0.5ml×1瓶
3
酶标包被板
12孔×8条
9
标准品稀释液
1.5ml×1瓶
4
样品稀释液
6ml×1瓶
10
说明书
1份
5
显色剂A液
6ml×1瓶
11
封板膜
2张 
6
显色剂B液
6ml×1/瓶
12
密封袋
1个

标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1.         标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

3200 ng/L
5号标准品
150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
1600 ng/L
4号标准品
150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
800 ng/L
3号标准品
150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
400 ng/L
2号标准品
150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
200 ng/L
1号标准品
150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

 2.         加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品*终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.         温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。  
4.         配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5.         洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.         加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.         温育:操作同3。
8.         洗涤:操作同5。
9.         显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10.     终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.     测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请*后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月
 

原创作者:上海劲马实验设备有限公司

推荐产品

产品分类

阿仪网 设计制作,未经允许翻录必究. 联系人:冯经理 联系电话:13817140470 ICP备案号:沪ICP备15015681号-6 总访问量:12379603

主营产品:ELISA试剂盒,猪ELISA试剂盒,鸡ELISA试剂盒,绵羊ELISA试剂盒,猴ELISA试剂盒,动物试剂盒、生物试剂、对照品、抗体、血清、培养基等

14

阿仪网推荐收藏该企业网站
-->
8:30-17:30
13817140470
13296071817