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当前位置:上海劲马实验设备有限公司 > 技术文章 > 上海劲马为您解开Elisa检测系列的疑问
发布日期:2015/11/3 11:07:47 阅读次数:3562次
很多人在做elisa试剂盒(酶联免疫试剂盒)实验时,总会出现多多少少的问题,比如说曲线的问题或是回收率偏高、偏低等现象,上海劲马现在就为您解开这一系列的疑问,让您在做实验的时候可以顺利检测出结果。
曲线问题:
1.OD值不正常:
试剂盒未回温,试剂盒回温到25℃
温度控制不好,控制正确温度
孵育时间不准确,控制孵育时间
洗涤时冲击力太大、浸泡时间过长、洗涤次数增 加,洗涤4-5次,每孔250ul,然后拍干阳光直射,对着风直接吹,避风避光酶标仪的波长错误,酶标仪的波长450nm抗体的稀释错误,正确的稀释抗体
水质问题,用娃哈哈矿泉水代替
2.白 板:
洗涤液配制错误,正确的配制洗涤液少加液体(错加液体),正确的步骤加液体
3.无梯 度:
标准品也污染,换标准品点板OD值不正常,控制温度时间在做一次人为点板,不要点板
4.线性 不 好:
OD值不正常,控制温度时间在做一次
回收率:
1.空白管阳性高:
样本本身就是阳性样本,换阴性样本做回收率空白管在实验中被污染,实验中防止交叉污染
2.偏 高:
添加量不准确,精准的添加量添加浓度不适合,添加合适的浓度取液吹干量多,准确的取液吹干取到其它相层液体,取需用相吹干复溶液未稀释或加入量少,正确的稀释复溶液
3.偏 低:
添加量不准确,精准的添加量添加浓度不适合,添加合适的浓度取液吹干量少,准确的取液吹干复溶液稀释错误或加入量多,正确的稀释复溶液假阴、阳性:
1,水质原因:
点复溶液验证,用娃哈哈矿泉水代替
2,实验操作原因:
吸取到其它相吹干,准确的取液吹干离心不彻底,延长离心时间样本的污染,更换样本乳化未处理完全,温浴(70℃)处理乳化现象
3,仪器试剂原因:
离心管未清洗干净,正确的洗涤器具有机溶剂的影响,做试剂空白看影响结果
4,衍生化试剂原因:
(长时间衍生化试剂变质),更换衍生化试剂
5,与曲线好坏相关,,保证曲线的正常。
我司提供免费检测服务:使用我司Elisa试剂盒,只收取试剂盒的费用,其他辅助试剂全部免费。我们将根据实验工作量和难易程度,双方协定实验周期,保质保量完成委托实验,并将实验结果和材料用特快专递免费寄送到您手中。欢迎来电订购!
原创作者:上海劲马实验设备有限公司
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