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蒙老师咨询：细胞上清测定LDH问题赏析

发布日期：2015/10/8 10:08:05 阅读次数：5229次

蒙老师咨询：细胞上清测定LDH问题赏析

节后天，黑龙江医科大学来电咨询：自己测细胞上清液出现了一些问题，有点茫然，希望技术能解答疑惑。根据蒙老师描述。测的是小鼠癌细胞" >肝癌细胞培养上清的LDH，实验设计时设了LDH释放孔（在细胞上清对比加入2%Triton）和自然释放孔（细胞上清对比加入空培养基）。释放孔LDH测定值比自然释放孔还低，不明白原因。

上海劲马技术解析：
tritonX100是一种表面活性剂。具有疏水端和亲水端，它可以将膜蛋白从细胞膜上解离下来，从而达到提取膜蛋白的目的，但是其没有维持酶活的作用。过量的tritonX100反而会破坏蛋白的表面亲水层而破坏蛋白结构，降低酶活。Triton X-100可以提高真核细胞细胞膜的通透性，但时常使用含 0.1%-0.5%Triton X-100的PBS或TBS。老师采用的浓度是否过高，导致酶活力丧失原因。

elisa试剂盒代测使用优点：ELISA试剂盒可特异性定量测定疾病相关蛋白，包括细胞因子、趋化因子、β淀粉样蛋白与信号转导靶标。

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原创作者：上海劲马实验设备有限公司

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